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BD培养基的配制讲诉

发表时间:2014-12-29  |  点击率:1206


   BD培养基(Medium)是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。


BD培养基的配制

  1.配料

  配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水,自然水〕→按照配方称取各种药品〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺,取药后立即盖上瓶盖》。

  2.溶解

  淀粉溶解:少量冷水调成糊状加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。

  3.调PH

  用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。

  4.过滤

  滤纸或棉花进行过滤。

  5.分装

  一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

  (1)三角瓶

  若作静置培养,则100 ml培养基/250 ml的三角瓶,zui多不能超过150 ml培养基/250 ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15~20 ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。

  (2)试管分装

  液体培养基一般装4~5 ml,约试管的1/4高度;

  固体斜面培养基一般装3~4 ml,约试管的1/5高度。

  6.包扎

  分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

  7.灭菌

  按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

  8.摆斜面

  灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。

  9.贮存

  培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。

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