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伯乐bio-rad转印槽的优点和使用前后的注意事项
点击次数:151 发布时间:2020-06-27 打印本页面 返回
   伯乐bio-rad转印槽的优点:
  1小时内转印2块10x7.5cm凝胶;也可以进行低强度的隔夜转印。
  电极丝相距4cm以产生强电场保证高效的蛋白转印。
  彩色标记的转印夹和电极确保转印过程中凝胶的正确定向。
  蓝色致冷芯可完全置于bio-rad转印槽内,在快速转印过程中吸收热量。
  既可作为完整的独立设备,也可作为一个模块与缓冲液槽和盖兼容。
 
  伯乐bio-rad转印槽使用前后的注意事项:
  1、转印前准备:在电泳结束前30分钟应开始准备工作在电泳过程中,提前准备转印所需物品:根据转印所用胶的大小,剪一稍比胶大一些的厚滤纸和一刚好大小的厚滤纸,将此两张膜浸入电转印液中;再剪四张大小为5cm×2cm的PVDF膜,左下角剪去一角,将此膜浸泡在甲醇溶液中不超过1min后取出浸入ddH2O中1min,取出浸入转印液中(切滤纸和膜时一定要戴手套,因为手上的蛋白会污染膜)(如果是NC膜,则用镊子捏住膜的一边轻轻置于有超纯水的平皿里,要使膜浮于水上,只有下层才与水接触。这样由于毛细管作用可使整个膜浸湿。若膜沉入水里,膜与水之间形成一层空气膜,这样会阻止膜吸水,靠毛细作用自然吸水后再完全浸入水中10min以排除气泡,随后浸泡入转移液中)
 
  2、转印结束,将膜从电转槽中取出,TBST稍加漂洗3次,每次5-10min;尔后浸没于封闭液中缓慢摇荡1h。封闭是将转印膜上坑坑洼洼的地方用BSA或脱脂奶粉填平,降低抗体的非特异性吸附产生很浓的背景。常用5%BSA和脱脂奶封闭,若是做磷酸化蛋白,只能用BSA,因为,奶中含有磷酸化蛋白。而封闭液浓度,可根据实验需摸索条件。蛋白面朝上,封闭2h,摇床速度不超过40,结束后直接进一抗。
电话:
86-021-51619380
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仪器部:

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